သတင်း - ultrafiltration centrifuge tube ၏အသုံးပြုမှုနှင့် ကြိုတင်ကာကွယ်မှုများ

ultrafiltration centrifuge tube ၏အသုံးပြုမှုနှင့်သတိထားပါ။

1) သင့်လျော်သော ultrafiltration tube ကိုရွေးချယ်ပါ။UF အမြှေးပါးများသည် အမျိုးမျိုးသော ဓာတုပစ္စည်းများအပေါ် သည်းခံနိုင်မှုအဆင့်တွင် ကွဲပြားသည်ကို သတိပြုပါ။ပုံမှန်အားဖြင့်၊ 10 kDa မော်လီကျူးအလေးချိန်ဖြတ်တောက်မှုရှိသော ultrafiltration ပြွန်များကို 35 kDa ကဲ့သို့သော စိတ်ဝင်စားဖွယ်ပရိုတင်း၏ မော်လီကျူးအလေးချိန်၏ 1/3 ထက်မပိုစေသော မော်လီကျူးအလေးချိန်ဖြတ်တောက်မှုဖြင့် ရွေးချယ်နိုင်သည်။စိတ်ဝင်စားသောပရိုတင်း၏မော်လီကျူးအလေးချိန်သည် 10 kd ဝန်းကျင်ဖြစ်ပါက၊ 3 KD ၏မော်လီကျူးအလေးချိန်ဖြတ်တောက်ထားသော ultrafiltration tube ကိုအသုံးပြုနိုင်ပါသည်။

(၂) လတ်လတ်ဆတ်ဆတ်ဝယ်ထားသော ultrafiltration သည် အသုံးမပြုမီတွင် အလွန်သန့်စင်သောရေဖြင့် ခြောက်သွေ့နေပြီး ရေသည် အမြှေးပါး၊ ရေခဲရေချိုးခြင်း သို့မဟုတ် ရေခဲသေတ္တာအတွင်း မိနစ်အနည်းငယ်ခန့် အအေးခံထားခြင်းဖြစ်သည်။ပရိုတင်းအရည်ဆိုလိုသည်မှာ ရေကို လောင်းချပြီး မည်မျှထည့်သည်၊ ပြွန်ထိပ်ရှိ အဖြူရောင်မျဉ်းထက် မပိုစေရ။လုပ်ဆောင်ချက်သည် ပေါ့ပါးပြီး ပရိုတင်းအရည်ကို မထည့်မီ ultrafiltration tube ကို ရေခဲပေါ်တွင် ကြိုတင်အအေးခံထားရန် လိုအပ်ပါသည်။

၃) ဒြပ်ထုနှင့် ဒြပ်ဆွဲအား၏ ဗဟိုချက်နှစ်ခုစလုံးသည် ဟန်ချက်ညီစေရန်ဖြစ်သည်။လည်ပတ်နှုန်းနှင့် အရှိန်သည် အလွန်မြန်သည်မဟုတ်ပါက ultrafiltration အမြှေးပါးကို တိုက်ရိုက်ထိခိုက်စေကြောင်း သတိပြုပါ။Centrifugal ultrafiltration ကို စတင်ခဲ့သည် ( centrifuge ကို 4 ဒီဂရီအထိ အအေးခံထားသည် ) ။မတူညီသော centrifuges များ၏ RPM ကို g သို့ပြောင်းပြီးနောက်၊ ကွဲပြားသွားသည်။Centrifuge ၏အရှိန်ကို အနိမ့်ဆုံးသို့ ချိန်ညှိပြီး အမြှေးပါးပေါ်ရှိ ဖိအားကို လျှော့ချခဲ့သည်။မှတ်ချက်၊ centrifuge သည် ၎င်း၏ ဦးတည်ရာအမြန်နှုန်းသို့ ရောက်ရှိပြီးနောက် centrifuge ကို ချန်ထားခဲ့ရန် သေချာစေပါ၊ သို့မဟုတ် သင့်တွင် ပြဿနာရှိပါက၊ သင်သည် ၎င်းကို ပထမဆုံးအကြိမ် မကိုင်တွယ်နိုင်ပါ။အမြှေးပါး၏ လှည့်ပတ်မှုကို ညွှန်ကြားချက်များနှင့်အညီ ချိန်ညှိထားပါသည် (ထောင့်ဖြတ်စက်သည် အမြှေးပါးဖြစ်ပြီး ဝင်ရိုးမှ ထောင့်မှန်ကျသော)။လက်တွေ့အသုံးပြုမှုတွင်၊ လမ်းညွှန်ချက်များပါရှိသည့် ယေဘူယျလည်ပတ်နှုန်းထက် နိမ့်သောကြောင့် centrifuge tube ၏သက်တမ်းကို သက်တမ်းတိုးနိုင်သည်။

၃) ဒြပ်ထုနှင့် ဒြပ်ဆွဲအား၏ ဗဟိုချက်နှစ်ခုစလုံးသည် ဟန်ချက်ညီစေရန်ဖြစ်သည်။လည်ပတ်နှုန်းနှင့် အရှိန်သည် အလွန်မြန်သည်မဟုတ်ပါက ultrafiltration အမြှေးပါးကို တိုက်ရိုက်ထိခိုက်စေကြောင်း သတိပြုပါ။Centrifugal ultrafiltration ကို စတင်ခဲ့သည် ( centrifuge ကို 4 ဒီဂရီအထိ အအေးခံထားသည် ) ။မတူညီသော centrifuges များ၏ RPM ကို g သို့ပြောင်းပြီးနောက်၊ ကွဲပြားသွားသည်။Centrifuge ၏အရှိန်ကို အနိမ့်ဆုံးသို့ ချိန်ညှိပြီး အမြှေးပါးပေါ်ရှိ ဖိအားကို လျှော့ချခဲ့သည်။မှတ်ချက်၊ centrifuge သည် ၎င်း၏ ဦးတည်ရာအမြန်နှုန်းသို့ ရောက်ရှိပြီးနောက် centrifuge ကို ချန်ထားခဲ့ရန် သေချာစေပါ၊ သို့မဟုတ် သင့်တွင် ပြဿနာရှိပါက၊ သင်သည် ၎င်းကို ပထမဆုံးအကြိမ် မကိုင်တွယ်နိုင်ပါ။အမြှေးပါး၏ လှည့်ပတ်မှုကို ညွှန်ကြားချက်များနှင့်အညီ ချိန်ညှိထားသည် (angular centrifuge case သည် အမြှေးပါးဖြစ်ပြီး ဝင်ရိုးမှ ထောင့်မှန်ကျသော)။လက်တွေ့အသုံးပြုမှုတွင်၊ လမ်းညွှန်ချက်များပါရှိသည့် ယေဘူယျလည်ပတ်နှုန်းထက် နိမ့်သောကြောင့် centrifuge tube ၏သက်တမ်းကို သက်တမ်းတိုးနိုင်သည်။

(4) ကျန်ရှိသော 1ml ကို စုစည်းသောအခါ၊ ကြားခံဖြေရှင်းချက် 50ul ကိုယူကာ 10ul ကို ဖြတ်၍ စီးဆင်းသွားပြီး အပြာရောင်ရှိမရှိ စစ်ဆေးရန်၊ ultrafiltration tube တွင် ပရိုတင်းဓာတ်များ ပျောက်ဆုံးနေခြင်းရှိ၊မရှိ စစ်ဆေးရန်။ပြွန်ယိုစိမ့်ပါက အပေါ်လွှာကို ပြန်လောင်းပြီး ultrafiltration စတင်ရန်အတွက် ပြွန်အသစ်တစ်ခုသို့ စီးဆင်းသွားပါသည်။ပြွန်များ လွတ်သွားခြင်း ရှိ၊ မရှိ အတိအကျ ဆုံးဖြတ်ရန်၊ စီးဆင်းမှု မပြုလုပ်မီ BSA ၏ 5mgml ဖြင့် 10 မိနစ်ကြာ centrifuge ဖြင့်၊ ပရိုတင်းကော်ပြန့် သို့မဟုတ် Bradford crude assay ကို လုပ်ဆောင်ပြီး ကျန်ရှိသည့် စုစည်းထားသော ပရိုတင်းရည်ကို ပေါင်းထည့်ခြင်းဖြင့် ဆက်လက်လုပ်ဆောင်ပါ (ရေခဲပေါ်တွင် လုပ်ဆောင်ပြီး ပရိုတိန်းများကို အပူပေးခြင်းမှ ကာကွယ်သည်) အထိ၊ အာရုံစူးစိုက်မှုအားလုံးကို ထည့်သွင်းပြီးပါပြီ။ပရိုတိန်းများ မိုးရွာသွန်းမှုဖြစ်ပေါ်ပါက ပြွန်ပိတ်သွားစေရန် အာရုံစူးစိုက်မှုပြုလုပ်နေစဉ်အတွင်း သတိထားပါ။မိုးရွာသွန်းမှုဖြစ်ပေါ်ပါက မိုးရွာသွန်းခြင်း၏ သီးခြားအကြောင်းရင်းမှာ ပရိုတင်းဓာတ်လွန်ကဲစွာပါဝင်မှု သို့မဟုတ် မသင့်လျော်သောကြားခံတစ်ခုဟုတ်မဟုတ် ဆုံးဖြတ်ပါ။ပရိုတိန်းမိုးရွာသွန်းမှုမဖြစ်ပေါ်မချင်း ကွဲပြားသောကြားခံဖြေရှင်းချက်များအား လဲလှယ်ခြင်းဖြင့် ယခင်ကို ultrafiltration ပြွန်များစွာကို တစ်ပြိုင်နက်တည်း စုပ်ယူခြင်းဖြင့် ဖြေရှင်းနိုင်ပါသည်။

(5) ပရိုတင်းဓာတ်ကို အာရုံစူးစိုက်ရန် ပထမအဆင့်အနည်းငယ်ကို အသုံးပြုပြီး ကြားခံကိုပြောင်းလဲလိုပါက ကြားခံအသစ် (0.22um ultrafiltration အမြှေးပါးမှတဆင့်) ပရိုတိန်းစုစုပေါင်း၏ 1ml ခန့်သို့ ညင်သာစွာထည့်ကာ သုံးလုံးအတွက် 1ml ခန့်ကို ပြန်လည်အာရုံစိုက်ပါ။ အလိုရှိသောပရိုတိန်းအာရုံစူးစိုက်မှုပေါ် မူတည်၍ နောက်ဆုံးစုစည်းထားသောနောက်ဆုံးအသံအတိုးအကျယ်နှင့်အတူဆက်တိုက်အချိန်များသည်ယေဘုယျအားဖြင့် 500ul ထက်မပိုဘဲ 200ul အတွင်းအထိဖြစ်သည်။အကြိမ်တိုင်းတွင် အနည်းဆုံး 10 × သို့မဟုတ် ထို့ထက်ပို၍ volume ဖြည့်တင်းခြင်းဖြင့် တွက်ချက်ထားသည့်အတိုင်း 1000 × သို့မဟုတ် ထို့ထက်ပိုသော သုံးကြိမ်တွင် ရရှိရန်၊ အခြေခံအားဖြင့် ကြားခံပြောင်းလဲမှုများစွာရှိသည်။

စာတိုက်အချိန်- နိုဝင်ဘာ-၀၉-၂၀၂၂